Instrucciones de montaje en diapositivas
Antes de comenzar el proceso de preparación de diapositivas, asegúrese de haber reunido todos los materiales necesarios, incluidos los portaobjetos, los resbalones de cubierta, las gotero o las pipetas, y cualquier producto químico o mancha que tenga la intención de utilizar.
Hay dos tipos principales de diapositivas con las que estará trabajando:
1. El tobogán de vidrio plano estándar.
2. La depresión o el tobogán del pozo, que presenta un pequeño pozo o sangría en su centro diseñado para contener una gota de agua o sustancia líquida. Estos son típicamente más caros y se usan comúnmente sin un deslizamiento de cubierta.
Los portaobjetos estándar se pueden hacer de plástico o vidrio, midiendo 1 x 3 pulgadas (25 x 75 mm) de tamaño y de 1 a 1.2 mm de espesor.
Para los toboganes húmedos, es esencial un deslizamiento de cubierta o cubierta. Esta es una pieza de vidrio (o plástico) ultra delgada que se coloca cuidadosamente sobre la caída de la muestra. Sin la cubierta, la tensión superficial haría que la gota formara una forma de domo. La cobertura contrarresta esta tensión, asegurando que la muestra se encuentre plana para un examen preciso con un enfoque mínimo. Además, la portada actúa como una protección de salvaguardia, evitando que la lente objetivo interfiera con la caída de la muestra.
Montes de diapositivas de microscopio
Los montajes de microscopio se refieren a los métodos utilizados para asegurar portaobjetos o muestras de microscopio para la observación. Hay principalmente cuatro tipos:
1. Montes de diapositivas:Estos son el tipo más común e implican colocar una muestra en un tobogán de vidrio plano, a menudo usando un medio de montaje (como un líquido o un gel) para mantenerlo en su lugar. Luego se agrega un deslizamiento de cubierta para proteger la muestra y proporcionar una superficie plana para la visualización.
2. Cavidad o monturas de pozo:Estos portaobjetos tienen un pequeño pozo o depresión en el centro, diseñados para contener una gota de líquido, como agua o un fluido de montaje especializado. Se usan cuando trabajan con muestras que requieren inmersión en un líquido.
3. Montajes temporales:Estas monturas no están destinadas a almacenamiento u observación a largo plazo. Implican métodos simples y rápidos como colocar una muestra en un tobogán con una gota de agua. A menudo se usan para observar organismos vivos o muestras sensibles al tiempo.
4. Montes permanentes:Estos están diseñados para el almacenamiento y la observación a largo plazo. Implican procedimientos más complejos, incluido el uso de medios de montaje especializados que se endurecen con el tiempo, encapsulando la muestra en un medio transparente. Este tipo de soporte a menudo se usa para diapositivas educativas e investigación científica.
Cada tipo de montaje tiene sus aplicaciones específicas y se elige en función de la naturaleza del espécimen y el propósito de la observación.
Cuatro formas comunes de montar una diapositiva de microscopio
Existen varios métodos comunes para montar un portaobjetos de microscopio, dependiendo del tipo de muestra y el propósito de la observación. Aquí hay cuatro formas comunes de montar una diapositiva de microscopio:
Montaje seco:
Procedimiento: En este método, una muestra se coloca directamente sobre un portaobjetos de microscopio limpio y seco. A menudo se usa para muestras que no requieren humedad o inmersión adicionales en un líquido.
Aplicaciones: el montaje en seco es adecuado para observar muestras sólidas como piezas de plantas, cabello o minerales.
Montaje húmedo:
Procedimiento: se coloca una pequeña gota de líquido (generalmente agua o un fluido de montaje especializado) en el portaobjetos, y la muestra se agrega a esta gota. Se coloca suavemente un deslizamiento sobre la muestra para evitar el secado y la distorsión.
Aplicaciones: los montajes húmedos se utilizan para observar organismos vivos, células o muestras que requieren inmersión en un líquido.
Montaje de calabaza:
Procedimiento: Esta técnica implica colocar una muestra en un portaobjetos y luego presionándolo suavemente con un deslizamiento de cubierta u otro portaobjetos para aplanarlo. Esto se usa comúnmente para tejidos blandos o piezas de plantas delicadas para crear una capa delgada y transparente para la observación.
Aplicaciones: los soportes de calabaza se utilizan para examinar los tejidos, especialmente en la biología vegetal.
Montaje de frotis:
PROCEDIMIENTO: Una pequeña cantidad de la muestra (generalmente una sustancia líquida o semi-líquida) se extiende de manera fina y uniforme a través de un portaobjetos, a menudo usando el borde de otro portaobjetos. Luego se permite secar al aire o se puede solucionar con un agente químico.
Aplicaciones: los soportes de frotis se usan comúnmente para observar microorganismos como bacterias o para preparar frotis de sangre para microscopía.
Estos métodos atienden a diferentes tipos de muestras y sus requisitos específicos para la observación. La elección de la técnica de montaje depende de factores como la naturaleza del espécimen, el propósito de la observación y el nivel deseado de detalle y claridad.
Manchas de microscopio
Las manchas de microscopio, también conocidas como manchas o colorantes biológicos, son sustancias utilizadas en la microscopía para mejorar el contraste y la visibilidad de las muestras biológicas. Funcionan uniéndose selectivamente a componentes celulares específicos, como proteínas, ácidos nucleicos o lípidos, lo que permite una fácil visualización y diferenciación de estructuras celulares. Aquí hay algunos tipos comunes de manchas de microscopio:
1. Hematoxilina y eosina (H&E):
Tipo: mancha de combinación.
Uso: una de las manchas más utilizadas en la histología, la hematoxilina mancha los núcleos celulares-púrpura, mientras que la eosina mancha el citoplasma y algunas estructuras extracelulares de color rosa.
2. Azul de metileno:
Tipo: tinte básico.
Uso: manchas núcleos celulares azules. Se usa comúnmente para estudios generales de citología y microbiología.
3. Giemsa:
Tipo: mancha de combinación.
Uso: utilizado para manchar las células sanguíneas, diferencia los componentes nucleares y citoplasmáticos en una variedad de colores, lo que permite la identificación de varios tipos de células.
4. Mancha de gram:
Tipo: mancha de combinación.
Uso: distingue entre dos categorías principales de bacterias: Gram-positiva (que retiene la mancha violeta cristalina) y el gramo negativo (que ocupa la contratinta de safranina).
5. Mancha de Wright:
Tipo: mancha de combinación.
Uso: utilizado principalmente para frotis de sangre, esta mancha permite la diferenciación de los tipos de glóbulos y la identificación de anormalidades.
6. yodo de Lugol:
Tipo: mancha a base de yodo.
Uso: utilizado junto con el yodo de Gram, se puede usar para mejorar el contraste de ciertas estructuras celulares.
7. Aceite rojo o:
Tipo: tinte lipofílico.
Uso: se une específicamente a los lípidos, lo que lo hace útil para manchar estructuras como gotas de grasa dentro de las células.
8. ácido periódico-schiff (PAS):
Tipo: mancha basada en la reacción química.
Uso: reacciona con carbohidratos, destacando estructuras como glucógeno, mucinas y otras glucoproteínas.
9. Toluidine Blue:
Tipo: tinte básico.
Uso: mancha los componentes ácidos en células y tejidos, incluidos los gránulos de mastocitos y los ácidos nucleicos.
10. Safranin:
Tipo: tinte básico.
Uso: utilizado como contratinda en la tinción de gram para colorear bacterias gramnegativas.
Estos son solo algunos ejemplos, y hay muchas otras manchas especializadas utilizadas para fines específicos en microscopía, como manchas especiales para tejidos conectivos, fibras nerviosas o estructuras celulares específicas. La elección de la mancha depende del tipo de muestra y la información necesaria del examen microscópico.
Pasos de tinción con microscopio
1. Comience preparando un tobogán de montaje húmedo, colocando su espécimen en un portaobjetos de microscopio limpio.
2. Usando un gotero o pipeta, recoge cuidadosamente una gota de la mancha elegida.
3. Coloque esta gota de mancha en el borde exterior del deslizamiento de su cubierta, asegurando que contacte el borde del portaobjetos.
4. Para facilitar la distribución uniforme de la mancha, coloque un trozo de servilleta o toalla de papel a lo largo del lado opuesto del deslizamiento de la cubierta, presionándola firmemente contra el borde.
5. Si es necesario, aplique una caída de mancha adicional para garantizar la cobertura completa de su espécimen.
6. Su diapositiva ahora está completamente preparada para la observación bajo el microscopio.
